期刊简介
本刊是卫生部主管、中国康复医学会和中日友好医院主办的医学学术核心期刊。为国家科技部中国科技信息中心科技论文统计源期刊，被国内各权威数据库收录。主要任务是报道国内外脊柱脊髓领域的最新学术进展，为临床医疗、康复及基础研究工作者提供学术交流场所。2003年已改为月刊，2006年内文增至80页，国内外公开发行。读者对象为从事脊柱外科、骨科、神经科、泌尿科、肿瘤科、放射科、康复科及基础研究等相关学科的专业技术人员。
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首页>中国脊柱脊髓杂志
- 杂志名称：中国脊柱脊髓杂志
- 主管单位：中国脊柱脊椎杂志
- 主办单位：中华人民共和国卫生部
- 国际刊号：11-3027/R
- 国内刊号：11-3027/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：卫生部医药卫生优秀期刊二等奖（05首届）期刊收录：北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中)
低氧预处理骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠急性脊髓损伤的实验研究
孟庆溪；王伟恒；孟庆美；孙子杰；罗盛昌；余将明；席焱海；叶晓健
关键词：脊髓损伤, 干细胞治疗, 骨髓间充质干细胞, 低氧, 凋亡, 迁移, 小胶质细胞
摘要：目的:研究低氧预处理骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)移植对大鼠急性脊髓损伤(spinal cordinjury,SCI)治疗效果的影响并探讨其可能的机制.方法:转绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的SD大鼠10只,体重55.6±4.2(50～60)g,通过改良全骨髓贴壁法从大鼠骨髓中分离培养大鼠BMSCs并进行并进行细胞纯度和分化能力鉴定.应用0、10、50、100、200和300μM的二氯化钴(CoCl2)低氧预处理BMSCs后,通过CCK-8法检测低氧对细胞增殖的影响,细胞血清剥夺培养0、6、12和24h后,流式细胞法检测血清剥夺对细胞凋亡的影响,Transwell法检测低氧对BM-MSCs培养6、12、24h后细胞迁移的影响,流式细胞法检测低氧对细胞凋亡的影响,PCR法检测相关分子通路,找出合适的低氧处理条件.体内实验,使用Allen法垂直打击建立SCI模型,实验分为A组(假手术组)、B组(对照组)、C组(BMSCs组)和D组(H-BMSCs组)(n=20).A组的大鼠进行外科手术,但不锤击脊髓,B、C和D组均进行锤击脊髓行SCI造模和蛛网膜下腔注射注射生理盐水和低氧预处理前后的BMSCs.通过术前,术后1、3、7、10、14、21、28天BBB评分研究大鼠的神经功能恢复,术后72h免疫荧光染色法确定移植细胞的存活情况和小胶质细胞激活情况,术后72h和28dHE染色评估脊髓组织病理损伤情况.结果:CCK-8结果表明CoCl2浓度越高对BMSCs增值能力抑制越大,100μM CoCl2培养24h可以明显降低BMSCs增殖(P＜0.05),提高BMSCs的凋亡(P＜0.05),但能够显著增强预处理后BMSCs 6和12h后的细胞迁移的数量(P＜0.05),显著降低细胞血清剥夺培养24h后细胞凋亡率(P＜0.05).动物实验,与B组相比,C组的治疗可显著提高14d、21d和28d的BBB评分(P＜0.05).D组的BBB评分在21d和28d时明显高于C组(P＜0.05).HE染色结果显示,BMSC移植可以显著减少脊髓损伤部位细胞死亡,出血和炎性细胞浸润,而与C组相比,D组中的脊髓病理学损伤更轻微.细胞移植72h后,在C组和D组中均可见绿色荧光细胞,且绿色荧光的细胞数量D组(254.0±35.5)中明显高于C组(143.2±22.3,P＜0.05).SCI 72h后Iba-1免疫荧光染色显示,与B组(759.0±114.3)相比,BMSC (544.8±37.1)和D组(422.4±56.0)小胶质细胞数明显减少(P＜0.05),且D组抑制小胶质细胞激活的能力更强(P＜0.05).结论:低氧预处理BMSCs通过提高移植细胞的存活率,增强抑制小胶质细胞的激活能力,提高了SCI后大鼠神经功能的恢复,机制为低氧预处理能够增强细胞的抗损伤和迁移能力,是一种提高BMSCs移植治疗SCI疗效的有效手段.
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